使用泥土高速冷冻离心理的所有回头都拥有回头自锁职能,可能轻松装卸,同时所有回头都可能高温高压灭菌,保险了使用者的安全性。
泥土高速冷冻离心理具体提取泥土DNA的步骤:
一、泥土样本预处置:
1、取500mg泥土样本至研磨管中。
2、参与980µL缓冲液,柔和涡旋混匀。
3、参与120μL裂解液。
4、将研磨管置于研磨仪中,40Hz处置40sec。
5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒。
6、转移上清液至2mL离心管中。参与250μL去蛋白液,手颠簸晃混匀。4℃搁置5min。
7、12000rpm离心3min,之后取不多于900μL上清液,转移至2mL离心管中。
8、参与1/3体积的结合液,柔和涡旋混匀。4℃搁置5min。
9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5mL离心管中。
10、参与1.5倍体积的缓冲液,立即奏乐混匀。
二、DNA提。
1、将DNA吸附柱套入2mL网络管中,备用。
2、将预处置混合液参与到DNA吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液。
3、将DNA吸附柱放回网络管,参与600µL漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液。
4、沉复一遍步骤3。
5、将DNA吸附柱放回网络管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液。
6、将DNA吸附柱放入新的干净1.5mL离心管中,在滤膜中央参与30-100µL洗脱液,室温搁置3min。而后12,000rpm离心1min,网络滤液即为样本DNA。
7、DNA样品可置于-20℃短期保留,-80℃持久保留。